И.И. Степанова, К.А. Артемьева, А.А. Степанов, И.М. Богданова, М.Н. Болтовская, Е.А. Пономаренко
Научно-исследовательский институт морфологии человека имени академика А.П. Авцына
ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского», г. Москва, 119991, Россия
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
Полный текст PDF
DOI: 10.26907/2542-064X.2022.4.535-550
Для цитирования: Степанова И.И., Артемьева К.А., Степанов А.А., Богданова И.М., Болтовская М.Н., Пономаренко Е.А. Применение клеточного иммуноферментного анализа для скрининга гибридом и получения перспективных продуцентов моноклональных антител // Учен. зап. Казан. ун-та. Сер. Естеств. науки. – 2022. – Т. 164, кн. 4. – С. 535–550. – doi: 10.26907/2542-064X.2022.4.535-550.
For citation: Stepanova I.I., Artemyeva K.A., Stepanov A.A., Bogdanova I.M., Ponomarenko E.A., Boltovskaya M.N. Application of In-Cell ELISA assay for hybridoma screening and selection of promising producers of monoclonal antibodies. Uchenye Zapiski Kazanskogo Universiteta. Seriya Estestvennye Nauki, 2022, vol. 164, no. 4, pp. 535–550. doi: 10.26907/2542-064X.2022.4.535-550. (In Russian)
Аннотация
В статье рассмотрены особенности и преимущества использования иммуноферментного анализа для проведения скрининга гибридом и отбора моноклональных антител, перспективных для использования в иммуногистохимических исследованиях и идентификации клеток in vitro. Поэтапно охарактеризована методика клеточного иммуноферментного анализа, демонстрируются его преимущества перед известными методами анализа структурных и секреторных белков. Предварительное проведение клеточного иммуноферментного анализа целесообразно использовать для отбора клонов, продуцирующих моноклональные антитела с интересующей специфичностью, определения оптимальной концентрации первичных антител для последующей постановки иммуногистохимической реакции и идентификации культивируемых клеток.
Ключевые слова: In-Cell ELISA, гибридома, моноклональные антитела, иммуногистохимия
Литература
- Taylor C.R., Burns J. The demonstration of plasma cells and other immunoglobulin-containing cells in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues using peroxidase-labelled antibody // J. Clin. Pathol. – 1974. – V. 27, No 1. – P. 14–20. – doi: 10.1136/jcp.27.1.14.
- Boveia V., Schutz–Geschwender A. Quantitative analysis of signal transduction with in-cell western immunofluorescence assays // Kurien B., Scofield R. (Eds.) Detection of Blotted Proteins. Methods in Molecular Biology, V. 1314. – N. Y.: Humana Press, 2015. – P. 115–130. – doi: 10.1007/978-1-4939-2718-0_13.
- Chen H., Kovar J., Sissons S., Cox K., Matter W., Chadwell F., Luan P., Vlahos C.J., Schutz-Geschwender A., Olive D.M. A cell–based immunocytochemical assay for monitoring kinase signaling pathways and drug efficacy // Anal. Biochem. – 2005. – V. 338, No 1. – P. 136–142. – doi: 10.1016/j.ab.2004.11.015.
- Pandre M.K., Shaik Sh., Pratap V.V.V.S., Yadlapalli P., Yanamandra M., Mitra S. A novel in-cell ELISA method for screening of compounds inhibiting TRKA phosphorylation, using KM12 cell line harboring TRKA rearrangement //Anal. Biochem. – 2018. – V. 545. – P. 78–83. – doi: 10.1016/j.ab.2018.01.014.
- Bishop G.A., Hwang J. Use of a cellular ELISA for the detection of cell surface antigens // Biotechniques. – 1992. – V. 12, No 3. – P. 326–330.
- Moerke N.J., Hoffman G.R. Development of in-cell Western assays using far-red fluorophores // Curr. Protoc. Chem. Biol. – 2011. – V. 3, No 1. – P. 39–52. – doi: 10.1002/9780470559277.ch100153.
- Renukaradhya J.G., Sriram V., Polakova K., Russ G., Brutkiewicz R.R. Development of a quantitative cell-based intracellular ELISA for the screening of B cell hybridoma supernatants: A novel rapid assay to detect positive clones // Hybrid Hybridomics. – 2004. – V. 23, No 6. – P. 373–379. – doi: 10.1089/hyb.2004.23.373.
- Grunow R., D’Apuzzo M., Wyss-Coray T., Frutig K., Pichler W.J. A cell surface ELISA for the screening of monoclonal antibodies to antigens on viable cells in suspension // J. Immunol. Methods. – 1994. – V. 171, No 1. – P.93–102. – doi: 10.1016/0022-1759(94)90232-1.
- Ogino T., Wang X., Ferrone S. Modified flow cytometry and cell-ELISA methodology to detect HLA class I antigen processing machinery components in cytoplasm and endoplasmic reticulum // J. Immunol. Methods. – 2003. – V. 278, No 1–2. – P. 33–44. – doi: 10.1016/s0022-1759(03)00224-2.
- Kashyap R.S., Kainthla R.P., Satpute R.M., Agarwal N.P., Chandak N.H., Purohit H.J., Taori G.M., Daginawala H.F. Differential diagnosis of tuberculous meningitis from partially-treated pyogenic meningitis by cell ELISA // BMC Neurol. – 2004. – V. 4. – Art. 16, P. 1–6. – doi: 10.1186/1471-2377-4-16.
- Shan Z., Yamasaki T., Suzuki A., Hasebe R., Horiuchi M. Establishment of a simple cell-based ELISA for the direct detection of abnormal isoform of prion protein from prion-infected cells without cell lysis and proteinase K treatment // Prion. – 2016. – V. 10, No 4. – P. 305–318. – doi: 10.1080/19336896.2016.1189053.
- Fuhrmann S., Kirsch M., Wewetzer K., Hofmann H.-D. Use of cell ELISA for the screening of neurotrophic activities on minor cell populations in retinal monolayer cultures // J. Neurosci. Methods. – 1997. – V. 75, No 2. – P. 199–205. – doi: 10.1016/s0165-0270(97)00073-3.
- Falahat R., Wiranowska M., Gallant N.D., Toomey R., Hill R., Alcantar N. A Cell ELISA for the quantification of MUC1 mucin (CD227) expressed by cancer cells of epithelial and neuroectodermal origin // Cell Immunol. – 2015. – V. 298, No 1–2. – P. 96–103. – doi: 10.1016/j.cellimm.2015.09.009.
- Schöler L., Le-Trilling V.T.K., Eilbrecht M., Mennerich D., Anastasiou O.E., Krawczyk A., Herrmann A., Dittmer U., Trilling M. A novel In-Cell ELISA assay allows rapid and automated quantification of SARS-CoV-2 to analyze neutralizing antibodies and antiviral compounds // Front. Immunol. – 2020. – V. 11. – Art. 573526, P. 1–11. – doi: 10.3389/fimmu.2020.573526.
- Filardo S., Di Pietro M., Pasqualetti P., Manera M., Diaco F., Sessa R. In-cell western assay as a high-throughput approach for Chlamydia trachomatis quantification and susceptibility testing to antimicrobials // PLoS ONE. – 2021. – V. 6, No 5. – Art. e0251075, P. 1–13. – doi: 10.1371/journal.pone.0251075.
- Kohl T.O., Ascoli C.A. Direct and indirect cell-based enzyme–linked immunosorbent assay // Cold Spring Harbor. Protoc. – 2017. – V. 2017, No 5. – doi: 10.1101/pdb.prot093732.
- Куделькина В.В., Халанский А.С., Макарова О.В., Цветков И.С., Косырева А.М., Алексеева А.И., Шелков А.Ю., Максименко О.О., Разживина В.А., Гельперина С.Э. Сравнительная морфологическая и биохимическая характеристика токсического действия доксорубицина и наносомальной формы PLGA-доксорубицина при лечении экспериментальной глиобластомы // Клиническая и экспериментальная морфология. – 2021. – Т. 10, № 1. – С. 58–65. – doi: 10.31088/CEM2021.10.1.58-65.
- Crowther J.R. ELISA. Theory and practice // Methods Mol. Biol. – 1995. – V. 42. – P. 1–218. – doi: 10.1385/0–89603–279–5:1.
- Lourenço E.V., Roque-Barreira M.-C. Immunoenzymatic quantitative analysis of antigens expressed on the cell surface (cell-ELISA) // Methods Mol. Biol. – 2010. – V. 588. – P. 301–309. – doi: 10.1007/978-1-59745-324-0-29.
- Wang X., Campoli M., Cho H.S., Ogino T., Bandoh N., Shen J., Hur S.Y., Kageshita T., Ferrone S. A method to generate antigen-specific mAb capable of staining formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections // J. Immunol. Methods. – 2005. – V. 299, No 1–2. – P. 139–151. – doi: 10.1016/j.jim.2005.02.006.
Поступила в редакцию
27.05.2022
Степанова Ирина Ильдаровна, научный сотрудник лаборатории патологии репродукции
НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «РНЦХ имени академика Б.В. Петровского»
Абрикосовский переулок, д. 2, г. Москва, 119991, Россия
E-mail: i-ste@yandex.ru
Артемьева Ксения Александровна, кандидат медицинских наук, научный сотрудник лаборатории патологии репродукции
НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «РНЦХ имени академика Б.В. Петровского»
Абрикосовский переулок, д. 2, г. Москва, 119991, Россия
E-mail: artemjeva_ksenia@mail.ru
Степанов Александр Алексеевич, инженер-исследователь лаборатории патологии репродукции
НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «РНЦХ имени академика Б.В. Петровского»
Абрикосовский переулок, д. 2, г. Москва, 119991, Россия
E-mail: 9163407056@mail.ru
Богданова Ирина Марковна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории патологии репродукции
НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «РНЦХ имени академика Б.В. Петровского»
Абрикосовский переулок, д. 2, г. Москва, 119991, Россия
E-mail: malaj43@mail.ru
Болтовская Марина Николаевна, доктор биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории патологии репродукции
НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «РНЦХ имени академика Б.В. Петровского»
Абрикосовский переулок, д. 2, г. Москва, 119991, Россия
E-mail: maribolt@mail.ru
Пономаренко Елена Алексеевна, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории морфологии воспаления
НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «РНЦХ имени академика Б.В. Петровского»
Абрикосовский переулок, д. 2, г. Москва, 119991, Россия
E-mail: ponomarenkoea75@mail.ru
![](http://kpfu.ru/docs/F46869432187/img608337246.jpg)
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.