KFU. Card publication. Эффективность экспрессионных систем на основе E.coli и B.subilis для получения мутантов РНКазы биназы

KAZAN
FEDERAL UNIVERSITY

- RUS
- 中文
- ES

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЭКСПРЕССИОННЫХ СИСТЕМ НА ОСНОВЕ E.COLI И B.SUBILIS ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МУТАНТОВ РНКАЗЫ БИНАЗЫ

Form of presentation

Articles in Russian journals and collections

Year of publication

2023

Язык

русский

Authors, employees of KFU

Vershinina Valentina Ivanovna, author

Dudkina Elena Vladimirovna, author

Ilinskaya Olga Nikolaevna, author

Kosnyrev Aleksandr Sergeevich, author

Nadyrova Alsu Ildarovna, author

Ulyanova Vera Vladimirovna, author

Bibliographic description in the original language

Nadyrova A.I. Effektivnost ekspressionnykh sistem na osnove E.coli i B.subilis dlya polucheniya mutantov RNKazy binazy /A.I.Nadyrova, A.S.Kosnyrev, V.V.Ulyanova, E.V.Dudkina, V.I.Vershinina, O.N.Ilinskaya //Moleklyarnaya biologiya. -2023. - T.57. -№5. - s.807-818.

Annotation

онуклеаза Bacillus pumilus (биназа) обладает выраженными цитотоксическими и онколитиче скими свойствами, а в высоких концентрациях может оказывать генотоксическое действие. До биться снижения токсического действия фермента на организм позволит использование мутантов, обладающих пониженной каталитической активностью с сохранением противоопухолевых свойств нативного фермента. В представленной работе методом сайт-направленного мутагенеза получены мутантные формы биназы с единичными заменами: Lys26Ala и His101Glu. В результате проведенно го сравнительного анализа систем экспрессии на основе Esсherichia coli и Bacillus subtilis показана це лесообразность использования гетерологичной системы на основе бацилл для продукции мутантов биназы. Методом ионообменной хроматографии выделены и очищены мутанты биназы со снижен ной каталитической активностью в гомогенном состоянии с максимальным выходом 25 мг/л. Ката литическая активность мутанта Lys26Ala составила 11, а His101Glu – 0.02%. Установлено, что мутант Lys26Ala, как и нативная биназа, обладает цитотоксичностью по отношению к опухолевым клеткам линий А549, ВТ-20 и HuTu 80, не оказывая при этом существенного влияния на популяцию нор мальных клеток WI-38. Для мутанта His101Glu не выявлено цитотоксической активности

Keywords

рибонуклеаза, биназа, экспрессионная система, Escherichia coli, Bacillus subtilis, каталитическая активность, цитотоксичность

The name of the journal

Молекулярная биология

Please use this ID to quote from or refer to the card

https://repository.kpfu.ru/eng/?p_id=294090&p_lang=2

Full metadata record

Field DC	Value	Language
dc.contributor.author	Vershinina Valentina Ivanovna	ru_RU
dc.contributor.author	Dudkina Elena Vladimirovna	ru_RU
dc.contributor.author	Ilinskaya Olga Nikolaevna	ru_RU
dc.contributor.author	Kosnyrev Aleksandr Sergeevich	ru_RU
dc.contributor.author	Nadyrova Alsu Ildarovna	ru_RU
dc.contributor.author	Ulyanova Vera Vladimirovna	ru_RU
dc.date.accessioned	2023-01-01T00:00:00Z	ru_RU
dc.date.available	2023-01-01T00:00:00Z	ru_RU
dc.date.issued	2023	ru_RU
dc.identifier.citation	Надырова А.И. Эффективность экспрессионных систем на основе E.coli и B.subilis для получения мутантов РНКазы биназы /А.И.Надырова, А.С.Коснырев, В.В.Ульянова, Е.В.Дудкина, В.И.Вершинина, О.Н.Ильинская //Молеклярная биология. -2023. - Т.57. -№5. - с.807-818.	ru_RU
dc.identifier.uri	https://repository.kpfu.ru/eng/?p_id=294090&p_lang=2	ru_RU
dc.description.abstract	Молекулярная биология	ru_RU
dc.description.abstract	онуклеаза Bacillus pumilus (биназа) обладает выраженными цитотоксическими и онколитиче скими свойствами, а в высоких концентрациях может оказывать генотоксическое действие. До биться снижения токсического действия фермента на организм позволит использование мутантов, обладающих пониженной каталитической активностью с сохранением противоопухолевых свойств нативного фермента. В представленной работе методом сайт-направленного мутагенеза получены мутантные формы биназы с единичными заменами: Lys26Ala и His101Glu. В результате проведенно го сравнительного анализа систем экспрессии на основе Esсherichia coli и Bacillus subtilis показана це лесообразность использования гетерологичной системы на основе бацилл для продукции мутантов биназы. Методом ионообменной хроматографии выделены и очищены мутанты биназы со снижен ной каталитической активностью в гомогенном состоянии с максимальным выходом 25 мг/л. Ката литическая активность мутанта Lys26Ala составила 11, а His101Glu – 0.02%. Установлено, что мутант Lys26Ala, как и нативная биназа, обладает цитотоксичностью по отношению к опухолевым клеткам линий А549, ВТ-20 и HuTu 80, не оказывая при этом существенного влияния на популяцию нор мальных клеток WI-38. Для мутанта His101Glu не выявлено цитотоксической активности	ru_RU
dc.language.iso	ru	ru_RU
dc.subject	рибонуклеаза	ru_RU
dc.subject	биназа	ru_RU
dc.subject	экспрессионная система	ru_RU
dc.subject	Escherichia coli	ru_RU
dc.subject	Bacillus subtilis	ru_RU
dc.subject	каталитическая активность	ru_RU
dc.subject	цитотоксичность	ru_RU
dc.title	Эффективность экспрессионных систем на основе E.coli и B.subilis для получения мутантов РНКазы биназы	ru_RU
dc.type	Articles in Russian journals and collections	ru_RU