"Изучение фундаментальных механизмов пластичности и направленной дифференцировки звёздчатых клеток печени для разработки клеточной биомедицинской технологии восстановления гепатоцитов"

(рук. д.м.н., проф. А.П. Киясов)

Исследование поддержано грантом РФФИ 12-04-97088 (2012-2014)

Результаты проекта:

В ходе выполнения проекта проведен сравнительный анализ фенотипа и закономерностей дифференцировки трансплантированных свежевыделенных и активированных in vivo и in vitro звёздчатых клеток печени, трансфецированных геном зеленого флуоресцирующего протеина GFP, после введения:

1) крысам, перенесшим операцию частичной гепатэктомии

2) крысам, перенесшим операцию частичной гепатэктомии с одновременной блокадой пролиферации гепатоцитов ацетиламинофлуореном,

3) крысам после повреждения печени четыреххлористым углеродом, 

4) крысам после повреждения печени четыреххлористым углеродом с одновременной блокадой пролиферации гепатоцитов ацетиламинофлуореном.

1) Трансплантация GFP-позитивных ЗКП в случае проведения ЧГ с введением ААФ приводит к появлению в печени реципиентов GFP-позитивных синусоидных клеток и гепатоцитов, тогда как в случае повреждения печени ЧХУ и ААФ – к появлению GFP-позитивных синусоидных клеток, гепатоцитов и холангиоцитов.

2) Трансплантация как нативных, так и активированных звездчатых клеток печени сохраняет свою эффективность для репопуляции гепатоцитов и стимулирует регенераторные процессы в печени (о чем свидетельствует появление в печени реципиентов GFP+, а-ФП+ ЦК19+ гепатоцитов на ранних сроках эксперимента) на изучаемых моделях повреждения печени (частичная гепатэктомия, токсическое повреждение четыреххлористым углеродом) при одновременном блокировании пролиферации гепатоцитов ацетиламинофлуореном. При этом значительно более выраженный стимулирующий эффект от введения ЗКП наблюдается после частичной гепатэктомии. Результаты трансплантации звездчатых клеток печени, активированных in vivo или in vitro, не позволили установить значимых различий между данными группами.

3) Трансплантация нативных клеток более эффективна для восстановления печени после частичной гепатэктомии с введением ААФ, тогда как на регенерацию печени после повреждения ЧХУ и ААФ более выраженный эффект оказывает введение активированных in vivo ЗКП.

4) Трансплантация как нативных, так и активированных ЗКП животным с изучаемыми моделями повреждения печени не приводит к их трансдифференцировке в миофибробласты и не сопровождается, таким образом, риском развития фиброза печени.

5) Стимуляция регенерации печени после частичной гепатэктомии, введения ААФ и трансплантации ЗКП осуществляется в 2 этапа: в первые двое суток введенные клетки путем синтеза факторов роста и установления непосредственных межклеточных контактов стимулируют активацию резидентных региональных стволовых клеток, вероятнее всего, располагающихся в синусоидах печени; начиная со 2-3 суток начинается процесс гепатоцитарной дифференцировки самих трансплантированных ЗКП, что приводит в этом случае к более быстрому снижению числа десмин-позитивных клеток ЗКП в паренхиме печени.

Исполнители проекта: Гумерова А.А., Газизов И.М., Титова А.А., Шафигуллина А.К., Заикина Э.И.,  Певнев Г.О., Бурганова Г.Р., Титова М.А., Мавликеев М.О.

Публикации по проекту:

  1. Burganova G. Liver cells proliferation and apoptosis in patients with alcoholic liver disease after autologous hematopoietic stem cell transplantation / G. Burganova, S. Abdulkhakov, I. Gazizov, A. Gumerova, M. Titiova, A. Odintcova, A. Kiassov // BioNanoScience. - 2017. - Vol.7, Is.2. - P.302-305.
  2. Shafigullina, A. Effect of Adenoviral Transduction of Hepatic Stellate Cells with Adv5-optHGF-RFP on their Phenotype / A. Shafigullina, E. Zaikina, E. Garanina, D. Sakhapov, A. Titova, M. Mavlikeev, A. Rizvanov, A. Gumerova, A. Kiassov // BioNanoScience. – 2017. – Vol. 7. – P. 419-422. DOI 10.1007/s12668-016-0378-7
  3. Zaikina, E.I. Native and Activated Hepatic Stellate Cells Stimulate Liver Regeneration in Rats After Partial Hepatectomy and 2-Acetylaminofluorene Injection / E.I. Zaikina, A.K. Shafigullina, A.A. Titova, G.R. Burganova, G.O. Pevnev, M.O. Mavlikeev, S.A. Shahmardanova, M.A. Titova, A.A. Rizvanov, A.A. Gumerova, A.P. Kiassov // BioNanoScience. – 2017. – Vol. 7(1). – P. 246–250. DOI 10.1007/s12668-016-0353-3
  4. Бурганова Г.Р. Роль макрофагов в патоморфогенезе алкогольной болезни печени / Г.Р. Бурганова, Р.В. Деев, А.П. Киясов // Гены и клетки. - 2017. - 12(1). - С.38-40.
  5. Burganova G.R. Peripheral blood mononuclear cell transplantation stimulates hepatocytes proliferation in patients with alcoholic liver cirrhosis / G.R. Burganova, S.R. Abdulkhakov, I. M. Gazizov, A. A. Gumerova, M.A. Titova, R. Deev, A. P. Kiyasov // UEG Journal: Abstract Issue. - 2017. - Vol.5, Suppl.1. - A396.
  6. Shafigullina A. Influence of adenoviral transduction with Adv5-optHGF-RFP on phenotype of hepatic stellate cells / A. Shafigullina, E. Zaikina, E. Garanina, A. Titova, M. Mavlikeev, A. Rizvanov, A. Gumerova, A. Kiassov // European Journal of Clinical Investigation. Special Issue: Abstracts of the 51st Annual Scientific Meeting of the European Society for Clinical Investigation, – Vol. 47, Issue Supplement S1. May 17-19, 2017, Genoa (Italy), - p.88-89.
  7. Zakirova E. Use of the active 3D matrix in combination with gene and cell therapy to stimulate skin regeneration (P260) / M Zhuravleva E Garanina A Salmakova A P Kiassov A A Rizvanov // ESGCT XXV Anniversary Congress in Collaboration with the German Society for Gene Therapy October 17–20, 2017 Berlin, Germany. - HUMAN GENE THERAPY. – 2017. – V.28. – P.A88.
  8. Мавликеев М.О. Cлучай синдрома Кароли: клинико-лабораторные особенности и патогистологический анализ / М.О. Мавликеев, А.А. Титова, А.Т. Чебочакова, И.Л. Плакса, Н.Ф. Гизатуллина, А.П. Киясов, Р.В. Деев // Актуальные вопросы фундаментальной, экспериментальной и клинической морфологии: материалы Всероссийской конференции молодых специалистов; под ред. Р.В. Деева; ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России. – Рязань: ООП УИТ-ТиОП, 2017. – С.221-223
  9. Burganova, G. Liver cells proliferation and apoptosis in patients with alcoholic liver disease after autologous hematopoietic stem cell transplantation / G. Burganova, S. Abdulkhakov, I. Gazizov, A. Gumerova, M. Titiova, A. Odintcova, A. Kiassov // BioNanoScience. - 2016. - Р 1-4.
  10. Zaikina, E. I. Native and Activated Hepatic Stellate Cells Stimulate Liver Regeneration in Rats After Partial Hepatectomy and 2-Acetylaminofluorene Injection / E.I. Zaikina, A.K. Shafigullina, A.A. Titova, G.R. Burganova, G.O. Pevnev, M.O. Mavlikeev, S. A. Shahmardanova, M.A. Titova, A.A. Rizvanov, A.A. Gumerova, A.P. Kiassov // BioNanoScience. - 2016. - Vol.6. - P.1-5.
  11. Shafigullina, A. K. Effect of Adenoviral Transduction of Hepatic Stellate Cells with Adv5-optHGF-RFP on their Phenotype / A.K. Shafigullina, E.I. Zaikina, E.E. Garanina, D.I. Sakhapov, A.A. Titova, M.O. Mavlikeev, A.A. Rizvanov, A.A. Gumerova, A.A. Kiassov // BioNanoScience. - 2016. - Vol. 6. - Р. 1-4.
  12. Шафигуллина, А. К. Звёздчатые клетки печени – региональные стволовые клетки или фактор микроокружения? / А. К. Шафигуллина, А. А. Гумерова, А. П. Киясов // Гены и клетки. - 2015. - Том X, № 4. - С. 23-28.  
  13. Шарипова Э.И. Влияние трансдукции звёздчатых клеток печени аденовирусным вектором Ad5-optHGF-optFGF-4-RFP на их фенотип in vitro и in vivo / Э.И. Шарипова, А.А. Титова, А.К. Шафигуллина, А.Р.Галявиева, Е.Е. Гаранина, М.О. Мавликеев, Г.О. Певнев, Г.Р. Бурганова, М.А. Титова, А.А. Ризванов, А.А. Гумерова, А.П. Киясов // Гены и клетки. - 2015. - Том Х, № 4. - С.114-117.
  14. Burganova G. R., Abdulkhakov S. R., Gumerova A. A., Histologic findings in liver biopsy of alcoholic cirrhosis patients after hematopoietic stem cell transplantation / /JOURNAL OF HEPATOLOGY. - 2015. - Vol.62, Is.. - P.S769-S769.
  15. Бурганова Г.Р. Влияние трансплантации перисинусоидальных клеток печени на регенерацию печени крыс после повреждения четыреххлористым углеродом и 2-ацетиламинофлуореном / Г.Р. Бурганова, А.А. Титова, Э.И. Шарипова, Г.О. Певнев, М.О. Мавликеев, И.М. Газизов, А.Р. Галявиева, А.К. Шафигуллина, М.С. Калигин, М.А. Титова, А.А Гумерова, А.П. Киясов // Гены и Клетки. - 2014. - Т.9, №3.
  16. Титова А.А. Звездчатые клетки печени стимулируют регенерацию печени крыс после частичной гепатэктомии на фоне подавления пролиферации гепатоцитов / А.А. Титова, Г.Р. Бурганова, Э.И. Шарипова, Г.О. Певнев, М.О. Мавликеев, И.М. Газизов, А.Р. Галявиева, А.К. Шафигуллина, М.С. Калигин, М.А. Титова, А.А. Гумерова, А.П. Киясов // Гены и Клетки. - 2014. - Т.9, №3. - С. 131-135.
  17. Gumerova A., Kiassov A., Abdulkhakov S., Gazizov I., Shafigullina A., Andreeva D., Trondin A., Kaligin M., Titova M., Yilmaz T. Cell sources of liver development and regeneration. In search of hepatic stem cells. Saarbrücken: LAP Lambert Academic Publishing, 2012, 128 p.
  18. Шафигуллина А.К. Гумерова А.А., Трондин А.А., Титова М.А., Газизов И.М., Бурганова Г.Р., Калигин М.С., Андреева Д.И., Ризванов А.А., Мухамедов А.Р., Киясов А.П. Трансплантированные звёздчатые клетки печени участвуют в регенерации органа после частичной гепатэктомии без риска развития фиброза печени. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия, 2012, Т.7, №3, C. 169-172.
  19. Шафигуллина А.К., Трондин А.А., Бурганова Г.Р., Титова А.А., Мавликеев М.О., Шарипова Э.И., Табанакова А.В., Газизов И.М., Калигин М.С., Титова М.А., Ризванов А.А., Гумерова А.А., Киясов А.П. Сравнение различных методов выделения, мечения и трансплантации звёздчатых клеток печени крысы. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия, 2013, Т.8, №3, C. 147-151.
  20. Газизов И.М., Калигин М.С., Андреева Д.И., Йылмаз Т.С., Гумерова А.А., Киясов А.П. Изменения микроструктуры печени после частичной гепатэктомии у крыс. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия, 2013, Т.8, №3, C. 101-105.
  21. Миянович О., Катина М.Н., Ризванов А.А., Киясов А.П. Анализ миофибробластов крысы, полученных из структур портальных трактов печени методом эксплантации. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия, 2013, Т.8, №3, C. 119-124.
  22. Шафигуллина А.К. Гумерова А.А., Трондин А.А., Титова М.А., Газизов И.М., Бурганова Г.Р., Калигин М.С., Андреева Д.И., Ризванов А.А., Мухамедов А.Р., Киясов А.П. Трансплантированные звѐздчатые клетки печени участвуют в регенерации органа после частичной гепатэктомии без риска развития фиброза печени. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия, 2012, Т.7, №3, C. 169-172.
  23. Shafigullina A., Gumerova A., Trondin A., Titova M., Gazizov I., Kaligin M., Andreeva D., Rizvanov A., Kiassov A. Hepatic stellate cells differentiate into hepatocyte-like cells in vitro and in vivo. Abstracts of the International Liver Congress 2012 – 47th Annual meeting of the European Association for the Study of the Liver, April 18-22, Barcelona, Spain. Journal of Hepatology, V.56(S2), P. S172.
  24. Gumerova A., Shafigullina A., Trondin A., Titova M., Kaligin M., Gazizov I., Andreeva D., Abdulkhakov S., Kiassov A. Hepatic stellate cells as a source for hepatocyte differentiation but no hepatic fibrosis development. Abstracts of the International Liver Congress 2012 – 47th Annual meeting of the European Association for the Study of the Liver, April 18-22, Barcelona, Spain. Journal of Hepatology, V.56(S2), P. S166.
  25. Shafigullina A., Gumerova A., Trondin A., Kiassov A., Titova M., Gazizov I., Kaligin M., Andreeva D., Rizvanov A. Dual nature of hepatic stellate cells in the liver: stem cells/progenitor cells microenvironment component. 20th United European Gastroenterology Week, October 20-24, 2012. Amsterdam, The Netherlands. Gut, 2012, V.61(S3), P. A106.